首页> 感受态细胞> 克隆感受态细胞> 化转
TG1感受态细胞
TG1感受态细胞
新品上架,欢迎选购!
价格 240.00
运费 10.00
规格 100ul×10  100ul×20
累计成交 0
数量
包 库存997包
收藏商品(0人气)
品牌 :TG1感受态细胞
货号 :BC120-01
商品毛重 :50.00g
商品名称 :RNA提取系列 300bp-10kb
规格 :100ul×10
商品产地 :北京
单位 :

储存条件:-70℃保存,避免反复冻融。不适合在液氮中保存。

 

 

产品介绍:

TG1菌株来源于大肠杆菌K-12,主要用于噬菌体展示(Phage Display),也可进行M13噬菌体相关的实验,也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变,提取的质粒中核酸酶含量较高,需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。

 

 

基因型:supE thi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F´ traD36 proAB lacIqZ _M15]

 

 

菌株抗性对氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、博莱霉素、庆大霉素、氯霉素和四环素敏感。

 

 

质粒转化步骤以氨苄青霉素抗性的pUC19质粒为例)

 

  1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA到细胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀。

 

 

 2.冰水浴中放置30分钟,不要晃动。

 

 

 3.42℃热击60秒钟,不要晃动。

 

 

 4.冰水浴中放置2分钟,不要晃动。

 

 

 5.加入500μl的室温的SOC或LB培养基。

 

 

 6.置于37℃摇床中,150-200rpm,复苏培养60分钟。

 

 

 7.取50-100μl菌液涂布在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上。待液体吸干后,倒置平板37℃培养12-24小时。

 

 

(平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm离心30秒钟,弃掉上清,留100μl左右的液体,用200μl吸头轻轻吹打散菌块,取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。)